. "Passage (biologie)"@fr . . . . "En culture cellulaire, le passage est le proc\u00E9d\u00E9 de sous-culture de cellules animales. Il est en g\u00E9n\u00E9ral fait pour produire un grand nombre de cellules \u00E0 partir de cellules pr\u00E9 existantes. En laboratoire, des cellules adh\u00E9rentes de mammif\u00E8re sont cultiv\u00E9es dans des flasques ou des boites de Petri de diam\u00E8tres vari\u00E9s, avec du SVF et du milieu et incub\u00E9es \u00E0 37 \u00B0C dans une atmosph\u00E8re de 5 % en dioxyde de carbone et en pr\u00E9sence d'eau pour avoir une humidit\u00E9 constante. Les cellules en culture vont alors cro\u00EEtre jusqu'\u00E0 tapisser enti\u00E8rement le fond de la flasque ou de la bo\u00EEte de Petri. En temps normal, par exemple pour une culture de cellules de type HeLa recouvrant 10 % de la surface de culture, il faudra entre deux et trois jours pour atteindre 100 % de confluence. Si rien n'est envisag\u00E9 \u00E0 ce stade, la nourriture commence \u00E0 se rar\u00E9fier et les cellules commencent \u00E0 mourir ; de plus les cellules qui sont amen\u00E9es \u00E0 se d\u00E9velopper sans s'adh\u00E9rer mourront plus vite et ne pourront pas \u00EAtre repiqu\u00E9es. Un passage est donc n\u00E9cessaire, c'est-\u00E0-dire que l'on va repiquer les cellules dans une nouvelle flasque avec du milieu de culture neuf. La manipulation se d\u00E9roule ainsi. Le milieu appauvri est enlev\u00E9, g\u00E9n\u00E9ralement \u00E0 l'aide d'une pipette reli\u00E9e \u00E0 une pompe \u00E0 vide. Les cellules sont lav\u00E9es avec un tampon phosphate salin appel\u00E9 PBS (phosphate buffered salin), ensuite une solution de trypsine est ajout\u00E9e afin de d\u00E9coller les cellules du fond de la flasque (laisser agir deux minutes \u00E0 37 \u00B0C dans l'incubateur). Ensuite on ajoute du milieu additionn\u00E9 de SVF (contenant des inhibiteurs de la trypsine) et l'on op\u00E8re des aspirations refoulements avec une pipette pour au maximum individualiser les cellules. On poursuit en pr\u00E9levant un dixi\u00E8me du volume de suspension cellulaire contenue dans la flasque, et on les d\u00E9pose dans une nouvelle flasque st\u00E9rile contenant du milieu DMEM neuf. On termine en pla\u00E7ant la flasque dans l'incubateur. Et le cycle recommence jusqu'au prochain passage. Le restant de cellules est \u00E9limin\u00E9 dans une solution javellis\u00E9e pour tuer ces derni\u00E8res. Pour de meilleurs r\u00E9sultats, le passage devra s'effectuer avant d'arriver \u00E0 100 % de confluence. \n* Portail de la biologie cellulaire et mol\u00E9culaire"@fr . . . . "Subculture (biology)"@en . . . . "2161551"^^ . . . . . . "2402"^^ . "Pasa\u017Cowanie kom\u00F3rek"@pl . "148482592"^^ . . "En culture cellulaire, le passage est le proc\u00E9d\u00E9 de sous-culture de cellules animales. Il est en g\u00E9n\u00E9ral fait pour produire un grand nombre de cellules \u00E0 partir de cellules pr\u00E9 existantes. En laboratoire, des cellules adh\u00E9rentes de mammif\u00E8re sont cultiv\u00E9es dans des flasques ou des boites de Petri de diam\u00E8tres vari\u00E9s, avec du SVF et du milieu et incub\u00E9es \u00E0 37 \u00B0C dans une atmosph\u00E8re de 5 % en dioxyde de carbone et en pr\u00E9sence d'eau pour avoir une humidit\u00E9 constante. Les cellules en culture vont alors cro\u00EEtre jusqu'\u00E0 tapisser enti\u00E8rement le fond de la flasque ou de la bo\u00EEte de Petri. En temps normal, par exemple pour une culture de cellules de type HeLa recouvrant 10 % de la surface de culture, il faudra entre deux et trois jours pour atteindre 100 % de confluence. Si rien n'est envisag\u00E9 \u00E0 c"@fr . . . . . . .